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摘要:芽孢杆菌能产生多种具有拮抗作用的蛋白质,抗菌蛋白是目前研究较多的一种物质。这些蛋白质可以在体外直接抑制或杀死病原菌,具有高效、低毒、广谱的特点。其在医药、农业和畜牧业上具有良好的应用价值和广阔的市场前景。本实验将对芽孢杆菌菌株XSG-6抗菌蛋白发酵条件进行优化研究,进一步提高抗菌蛋白的产量,降低抗菌蛋白的生产成本。
本实验探讨了培养基组成、培养时间、不同的起始pH值和接种量对抗菌蛋白抑菌活性的影响,以求得产生抗菌蛋白的最佳发酵条件。采用单因素试验测定碳源、氮源和无机盐对发酵产量的影响,得到最佳培养基配方为:麦芽糖、牛肉膏和硫酸镁。采用最优培养基,固定摇瓶培养的其它发酵条件后,对最佳发酵时间、温度、初始pH值和接种量进行逐一优化,得出最佳发酵条件为:36h,初始pH值5,接种量6%。
关键词 芽孢杆菌;抗菌蛋白;发酵条件;优化研究
目录
摘要
Abstract
1 绪论-1
1.1 芽孢杆菌的研究背景-1
1.1.1 芽孢杆菌的主要特征-1
1.1.2 芽孢杆菌的应用-1
1.2 抗菌蛋白的研究背景-2
1.2.1 抗菌蛋白的分类-2
1.2.2 抗菌蛋白的特点-3
1.2.3 抗菌蛋白的作用机制-3
1.2.4 抗菌蛋白的应用-5
1.2.5 抗菌蛋白的研究现状-5
1.3 本课题的研究意义-6
2 材料与方法-7
2.1 试验材料-7
2.1.1 菌种-7
2.1.2 培养基-7
2.1.3 试剂-8
2.1.4 仪器与设备-8
2.2 方法-9
2.2.1 菌株活化与保藏-9
2.2.2 摇瓶发酵培养-9
2.2.3 培养基的优化-9
2.2.4 发酵条件的优化-10
2.2.5 粗酶液制备-10
2.2.6 打孔扩散法-10
2.3 技术路线-11
3 结果与讨论-12
3.1 培养基的优化-12
3.1.1 最佳碳源的测定-12
3.1.2 最佳氮源的测定-13
3.1.3 最佳无机盐的测定-14
3.1.4 最适培养基的确定-14
3.2 发酵条件的优化-15
3.2.1 最适培养时间的测定-15
3.2.2 最适初始pH值的测定-16
3.2.3 最适接种量的测定-17
3.2.4 最适发酵条件的确定-18
结论-19
致谢-20
参考文献-21