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【摘要】肠道菌群的改变会引起很多疾病,研究显示,饮食能够调节肠道菌群。本文通过高脂饲料喂养大鼠建立高脂模型,探讨高脂饮食对大鼠肠道菌群的影响。采用酚/氯仿法对大鼠粪便中细菌基因组DNA的抽提,对16S rDNA 的V3区进行PCR扩增和变性凝胶梯度电泳(DGGE)的测定。试验结果显示,高脂组的大鼠体质量与正常对照组相比显著增加, 呈明显肥胖态; 通过Quantity One分析软件采用UPGAMA法建立高脂模型组与空白对照组的聚类分析。可知空白对照组与高脂模型组肠道菌群差异性显著(P<0.05);高脂模型组对照空白对照组,肠道菌群数量减少,肠道菌群多样性降低。从而表明高脂饮食可引起肠道菌群结构的改变。高脂饮食通过改变肠道菌群的结构,从而导致肥胖的产生。
【关键词】高脂饮食;肠道菌群;Quantity One;多样性
目录
摘要
Abstract
1前言-1
2实验方法-3
2.1实验仪器-3
2.2材料-3
2.2.1饮食诱导高脂模型的建立-3
2.2.2实验状态下大鼠状态的观察-3
2.2.3样品的采集-3
2.3细菌基因组DNA提取-3
2.4 PCR反应-4
2.4.1 PCR的反应体系-5
2.4.2琼脂糖凝胶电泳-5
2.5变性梯度凝胶电泳(DGGE)-6
2.5.1DGGE凝胶的制备:-6
2.5.2 DGGE电泳:-6
3 实验结果-7
3.1 DNA含量的测定-7
3.2 细菌16S rDNA 的V3区高变区PCR扩增-8
3.3 DGGE图谱-8
3.4 肠道菌群结构的分析-9
4结论-12
5参考文献(References)-13
6致谢-14