摘 要：本实验以纤维素做载体，以高碘酸钠为载体活化剂，探讨了木瓜蛋白酶固定化工艺条件。实验结果表明，木瓜蛋白酶固定化的最适工艺条件为：pH值8，交联时间18 h，酶溶液浓度4.Og/L，NaIO4浓度为0.2mol/ L，固定化木瓜蛋白酶的活力15.441 U/g。固定化木瓜蛋白酶的米氏表观常数高于溶液酶，表明固定化木瓜蛋白酶与底物的亲和力更低。

关键词：木瓜蛋白酶；固定化；纤维素；米氏表观常数

目录

摘要

Abstract

0  前言-1

1  实验材料与设备-2

1.1 实验试剂与材料-2

1.2 实验仪器设备-3

2  实验方法-3

2.1 木瓜蛋白酶固定化制备工艺-3

2.2  0.6％酪蛋白溶液的配制-3

2.3  游离木瓜蛋白酶溶液的配制及酶活的测定-4

2.4  固定化木瓜蛋白酶活力的测定-4

2.5  米氏表观常数的测定-5

2.5.1  木瓜蛋白酶溶液的配制-5

2.5.2  木瓜蛋白酶溶液米氏表观常数-5

2.4.3  固定化木瓜蛋白酶米氏表观常数的测定-5

2.4.4  米氏表观常数Km计算-5

3  实验结果与分析-6

3.1  木瓜蛋白酶溶液的浓度对固定化木瓜蛋白酶活力的影响-6

3.2 交联时间对固定化木瓜蛋白酶活力的影响-7

3.3 高碘酸钠NaIO4浓度对固定化木瓜蛋白酶活力的影响-7

3.4  pH值对固定化木瓜蛋白酶活力的影响-9

3.5 游离木瓜蛋白酶与固定化木瓜蛋白酶的Km测定-10

4 实验结论-11

参考文献-12