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分类:农业大学 论文字数:5567 需要金币:500个
摘要:目前实验室获得番茄红素异构体的方法主要有两种。一种是天然番茄中提取番茄红素,其中含有一定量的顺势异构体。而以分析检测顺式异构体为目的则主要以购买全反式番茄红素纯品,经碘诱导生成顺式异构体的方法为主。碘是一种非常活跃的催化剂,常用于使分子二级结构发生弯曲,改变其构型。使其产生多种顺式异构体。这在番茄红素全反式异构体异构化分析实验中已经是多年共识。
本文利用制备型高效液相色谱分离碘诱导番茄红素顺反异构体,并对其中一个组分进行收集,送检质谱与核磁共振谱;经鉴定,所收集的组分为7-顺番茄红素。
关键词:番茄红素,顺式异构体,高效液相色谱,质谱,核磁共振
经过无数科学家的努力,番茄红素在紫外可见光区,中红外光区,拉曼光谱中,X-射线衍射光谱中,质谱,核磁共振谱中的信号及谱图特点基本已经有完善的记录和描述。各种光谱检测方法已经较为成熟。其中番茄红素因其多不饱和链中的共轭呈色结构,在紫外-可见光区具有非常明确及可靠的特征吸收峰。因此,可以用比色法对番茄红素进行定性和定量检测。番茄红素顺反异构体之间存在光谱差异,与全反式异构体相比,顺式异构体电子吸收光谱的最大吸收波长存在几个纳米的“蓝移”,同时在360nm紫外区,存在顺式异构体独有的特征吸收峰。依据这些明确的光谱特点,可以用来检测顺式异构体[14]。
Fröhlich[15]等人已获得1H NMR和2D NMR (gCOSY, TOCSY, TROESY)的相关数据确认了(5Z,9’Z)-, (9Z)-, (5Z,9Z)-, (all-E)-, 和(5Z)-番茄红素的几何异构结构。Tiziani[16]等人发表了番茄汁中顺反番茄红素异构体的1H 和13C NMR的相关化学位移信息。但仍缺乏高质量的番茄红素顺反异构体NMR图谱。
本实验将使用制备级高效液相色谱对一种番茄红素几何异构体进行毫克级的制备,使用制备型色谱进行番茄红素几种异构体的分离,纯化;获得样品后送检进行NMR氢谱、碳谱、氢氢COSY分析,期望能够对其化学结构,特别是顺式异构所发生的位置做出鉴定。