摘要：本研究采用多酶分步复合水解方式制备黑豆肽，并通过大孔吸附树脂静态吸附，乙醇洗脱分级的方式对其进行分离纯化，制得2种不同黑豆品种的混合肽及8种分离肽。采用DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力、超氧自由基清除能力、脂质过氧化抑制力四种抗氧化方法对10种肽进行抗氧化活性检测，结果表明：随着乙醇浓度的增大，各分离组分的抗氧化活性呈递增趋势，其中75%和100%的乙醇洗脱肽的抗氧化活性接近，但75%的乙醇洗脱的肽得率（25%左右）远比100%乙醇洗脱的肽得率（6%左右）高，75%的乙醇洗脱制备黑豆肽具有更好的开发实用价值。

对几种抗氧化方法进行相关性比较结果表明：DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力和超氧自由基清除能力三种方法所测的抗氧化值具有较高的相关性，脂质过氧化抑制力(TBARS )和其他方法的相关性则较差。

关键词 黑豆肽；抗氧化活性；相关性

目录

摘要

Abstract

1 绪论-1

1.1 黑豆概述-1

1.2 生物活性肽概述-1

1.3 大豆肽制备的发展概况-2

1.4 大豆蛋白酶解物的营养特性及生理功能-3

1.4.1 氨基酸种类多样并且含量丰富-3

1.4.2 促进机体免疫调节-3

1.4.3 抗氧化性-3

1.4.4 降血脂和抑制胆固醇作用-3

1.4.5 其他功能特性-3

1.5 大豆肽抗氧化的研究进展-4

1.6 研究的目的及意义-4

2 材料与方法-6

2.1 实验材料与仪器-6

2.1.1 实验材料-6

2.1.2 主要实验仪器-6

2.2 实验方法-6

2.2.1 黑豆蛋白的制备-6

2.2.2 蛋白质含量的测定-7

2.2.3 黑豆蛋白的多酶复合酶解工艺-8

2.2.4 黑豆蛋白酶解物水解度的测定-8

2.2.5 肽含量的测定-9

2.2.6 DA201-C大孔吸附树脂分离黑豆肽-9

2.2.7 黑豆蛋白酶解物抗氧化活性的测定-10

3结果与分析-12

3.1 黑豆蛋白酶解的水解度与肽含量测定结果-12

3.1.1 蛋白质含量标准曲线的制作及蛋白质含量测定结果-12

3.1.2 多酶复合水解的水解度及肽含量测定结果-12

3.2 大孔吸附树脂分离黑豆肽各洗脱组分的抗氧化活性比较-12

3.3 抗氧化方法的相关性研究结果-14

结 论-16

致谢-17

参考文献-18

附录-18

1 考马斯亮兰试剂配制-19

2 双缩脲法试剂配制-19