摘    要

目的：支气管哮喘治疗的难点在于治疗过程中缺乏理想的准确评估哮喘病情严重程度及疾病早期诊断指标。为此，本研究拟初步探讨血清hsa-miR-17-5p与儿童哮喘的关系，寻求差异表达的血清microRNAs（miRNAs）作为哮喘疾病诊断的潜在生物标记物。方法：采用荧光定量PCR方法(quantitative Real-time PCR, qRT-PCR)检测儿童哮喘组和健康对照组的血清样本中hsa-miR-17-5p水平。通过受试者工作特征曲线 （receiver operating characteristic curve，简称ROC曲线）分析，单个hsa-miR-17-5p作为哮喘诊断指标的临床价值。结果：荧光定量PCR数据统计表明，与健康对照组相比，儿童哮喘组血清hsa-miR-17-5p的相对表达水平显著增加(P<0.01）。ROC曲线分析结果显示hsa-miR-17-5p曲线下面积（AUC）为70.3%，灵敏度为75.0%，特异度为60.0%。结论： hsa-miR-17-5p有可能成为哮喘潜在的诊断标志物。

目录

1. 引言 4

2. 材料 5

2.1. 病例样本 6

2.1.1. 病例分组 6

2.1.2. 样本的收集 6

2.1.3. 病例样本纳入及排除标准 6

2.2. 试剂 6

2.3. 主要仪器及耗材 6

3. 方法 6

3.1. 总RNA样本制备 6

3.2. MiRNAs茎环引物及qRT-PCR引物设计 7

3.3. MiRNAs表达的qRT-PCR分析 8

3.3.1. 反转录合成cDNA 8

3.3.2. qRT-PCR定量 9

3.4. qRT-PCR数据及统计分析 9

4. 实验结果与分析 9

4.1. hsa-miR-17-5p在血清中的表达量上调 9

4.2. hsa-miR-17-5p在血清中表达的ROC曲线分析 10

5. 讨论 10

参考文献 12

致谢 13