摘    要

耳蜗的柯蒂氏器（organ of Corti，OC）和螺旋神经节（spiral ganglion neuron，SGN），主要由毛细胞、支持细胞和神经元组成。多种基因参与调节内耳的发育已经得到证实，临床上，这些基因的突变会导致内耳的严重缺陷。几种转录因子在内耳发育中起着决定性作用。Lmo3是Lim-only蛋白中的一种，Lim-only蛋白是Lim蛋白亚家族，有Lmo1～Lmo4四个成员，Lmo3最初通过与Lmo1、Lmo2的序列相似性，经过同源克隆获得，因为它没有明确的功能提示，所以对它的功能的研究很少。近年来，人们发现，Lmo3是多巴胺诱导的星形细胞反应变化上调的基因之一。Lmo3广泛分布于成年大鼠和小鼠的中枢神经系统中，提示Lmo3在中枢神经系统中起着重要作用。该研究主要研究了转录因子Lmo3在小鼠耳蜗中对维持螺旋神经节、毛细胞和支持细胞功能的作用和其在成年小鼠耳蜗的功能和相关的作用机制，使我们能具体的研究耳聋性疾病的发病原理和病理过程，可以更好的为未来的临床治疗提供理论依据。

在本研究中，我们通过敲除成年小鼠的转录因子Lmo3，研究了Lmo3对螺旋神经节细胞、毛细胞和支持细胞的形态和功能的影响。对成年小鼠耳蜗的功能和形态进行了研究，观察和分析了从胚胎到成年小鼠整个发育过程中耳蜗功能的机制，以期全面了解Lmo3在耳中的作用。耳蜗发育和功能维持的作用为感音神经性耳聋的临床治疗提供了理论依据。本研究发现，在P40时期，对比Lmo3laz/+基因型小鼠、Lmo3laz/laz基因型小鼠与C57BL/6野生型小鼠的ABR听力检测数据，我们不难发现，Lmo3的敲除对小鼠的耳蜗功能造成非常严重的损伤，在纯音条件下20000Hz~28000Hz都没有正常的波形出现。

 

关键词：毛细胞；支持细胞；柯蒂氏器；Lmo3；听性脑干反应；听力损伤；螺旋神经节

目    录

摘要 2

Abstract 2

前言 5

1研究方向 6

2实验的内容与设计 7

2.1实验研究的目的与意义 7

2.2实验内容 8

3实验材料与方法 8

3.1实验动物 8

3.2主要试剂、药物及其他溶液配制 8

3.2.1小鼠基因型鉴定所需要的试剂 8

3.2.2耳蜗脱钙试剂 9

3.3主要仪器与设备 9

3.4实验方法 10

3.4.1小鼠基因型鉴定 10

3.4.2 听性脑干反应 (auditory brainstem response，ABR) 11

4实验结果 12

4.1基因型鉴定结果 12

4.2 ABR测试结果 13

4.2.1 C57BL/6 13

4.2.2 Lmo3 laz/+ 13

4.2.3 Lmo3 laz/laz 14

5结果分析与讨论 15

5.1 结果分析 15

5.1.1 click结果分析 15

5.1.2 纯音结果分析 16

5.2 讨论 16

附表 18

附表1.基因型鉴定引物 18

参考文献 19

致谢 20