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摘要:本实验根据盐酸克伦特罗的理化性质,采用重氮化法将盐酸克伦特罗小分子与大分子载体蛋白BSA、OVA偶联,合成了人工抗原CL-BSA、CL-OVA。使用紫外分光光度计在波长为250nm-350nm处对CL、大分子蛋白BSA、OVA、偶联物CL-BSA、CL-OVA进行扫描,结果发现偶联物峰值发生明显偏移,人工抗原偶联成功。采用SDS-PAGE凝胶电泳法对偶联物进行鉴定,结果发现偶联物的分子量明显比载体蛋白的分子量大,再一次印证人工抗原合成成功。用偶联物CL-BSA对小鼠进行免疫,两周后断尾取血,使用CL-OVA做包被抗原,用间接ELISA法检测血清效价。三次免疫后的最高效价均可以达到1:6400,证明小鼠产生了针对盐酸克伦特罗的抗体,偶联物CL-BSA具有良好的免疫活性,盐酸克伦特罗人工抗原制备成功。
关键词:盐酸克伦特罗;人工抗原;紫外检测法;酶联免疫吸附技术
目录
摘要
Abstract
1绪论-1
1.1盐酸克伦特罗的简介-1
1.2盐酸克伦特罗的性质和作用原理-1
1.3盐酸克伦特罗残留对人和动物的危害-2
1.4盐酸克伦特罗的中毒事件-2
1.5常见的检测方法-3
1.5.1生物效应测定法-3
1.5.2理化检测法-3
1.5.3免疫学检测法-3
1.5.4生物传感器检测法-4
1.6酶联免疫吸附分析法-4
1.6.1酶联免疫吸附分析法的基本原理-4
1.6.2酶联免疫吸附分析法在兽药残留检测当中的应用-4
1.7本文研究的主要目的-4
2实验材料和方法-6
2.1实验材料-6
2.1.1实验器材-6
2.1.2主要试剂-6
2.2实验方法-9
2.2.1盐酸克伦特罗人工抗原合成的方法-9
2.2.2紫外扫描分析-9
2.2.3凝胶电泳法鉴定人工抗原合成结果-10
2.2.4间接酶联免疫分析法实验步骤-10
3结果与分析-11
3.1盐酸克伦特罗与载体的偶联-11
3.2紫外扫描结果-11
3.3 凝胶电泳法鉴定结果-13
3.4血清效价测定-14
结论-16
致谢-17
参考文献-18