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摘要:芽孢杆菌(Bacillus) 是一种好氧或兼性厌氧产芽孢的革兰氏阳性杆状细菌,能产生多种抗菌活性物质,主要有肽类、脂肽类、细菌素等低分子量的抗生素和蛋白类的高分子量抗菌物质以及多种维生素等。随着医药、食品、化妆品、环境治理等各个行业的发展,人们对其产生的具有抗菌活性的天然产物产生了浓厚的兴趣,对这些活性成分结构的鉴定也成为科学家研究的重点。为了开发新型安全的抗菌活性物质,分离纯化是其中的关键步骤之一。本文对芽孢杆菌产生的抗菌活性物质通过多种色谱方法进行分离纯化,如采用了“724”阳离子交换树脂吸附、SepbadexG-75凝胶过滤、DEAE纤维素阴离子交换柱层析及高效液相色谱(HPLC)层析等方法。
最终确定通过“724”阳离子交换树脂吸附和高效液相色谱层析能够分离出抗菌物质,抑菌效果明显。通过DEAE纤维素阴离子交换柱层析能够分离出有活性的组分,但抑菌效果不是很明显。而通过SepbadexG-75凝胶过滤分离纯化未能获得有活性的物质。
关键词:芽孢杆菌;抗菌活性物质;色谱;分离纯化
目录
摘要
Abstract
1 绪论-1
1.1 芽孢杆菌及其代谢物质的概述-1
1.1.1芽孢杆菌的研究现状-1
1.1.2芽孢杆菌代谢物质的概述-1
1.2芽孢杆菌代谢物质的分类-2
1.2.1核糖体合成途径产生的抗菌物质-2
1.2.2非核糖体合成途径产生的抗菌物质-2
1.3 芽孢杆菌代谢物质的应用-3
1.3.1在农业上的应用-3
1.3.2在工业上的应用-4
1.3.3在医学上的应用-4
1.3.4在水产生态环境上的应用-4
1.3.5在畜牧业上的应用-5
1.4课题的内容及目的和意义-5
2 材料与方法-6
2.1 实验材料-6
2.1.1 主要原料与试剂-6
2.1.2 主要仪器设备-6
2.2 实验方法-7
2.2.1 菌种活化-7
2.2.2发酵液的制备-7
2.2.3 抑菌实验-7
2.2.4 抗菌物质的分离纯化-7
3 结果与分析-10
3.1 菌株SH-1的活性检测-10
3.2 “724” 阳离子交换树脂吸附-10
3.3 SepbadexG-75分子筛凝胶层析-11
3.4 DEAE纤维素阴离子交换柱层析-11
3.5高相液相色谱分析-12
结论-14
致谢-15
参考文献-16