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摘要:采用单因素试验与Box-Behnken试验设计优化斑褐孔菌多糖的热水浸提工艺,得到热水浸提斑褐孔菌多糖的最佳工艺如下:液料比30 mL/g,浸提温度80.21 ℃,浸提时间2.09 h,此时斑褐孔菌粗多糖得率为1.64%。采用DEAE-52离子交换层析柱分离纯化斑褐孔菌粗多糖,获得3个多糖组分命名为F1、F2和F3。纯化后的多糖组分从溶解性方面可以看出均能在去离子水、稀碱溶液中完全溶解,而在二甲基亚砜中溶解度极低,在无水乙醇、氯仿等其他有机溶剂中均不能溶解;从化学组成方面来说该多糖中F1、F2和F3均含有糖类、糖醛酸和蛋白质,无游离还原糖及多酚类物质。
关键词 斑褐孔菌;热水浸提;多糖;分离纯化;理化性质
目录
摘要
Abstract
1绪论-1
1.1斑褐孔菌的研究现状-1
1.2真菌多糖提取的几种方法-1
1.2.1水浴法-1
1.2.2酶解法-1
1.2.3超声波提取法-1
1.2.4微波提取法-1
1.3多糖的分离纯化-2
1.3.1脱蛋白-2
1.3.2脱色-2
1.3.3脱盐及小分子物质的去除-2
1.3.4真菌多糖的纯化方法-3
1.3.5多糖纯度的鉴定-3
1.4多糖的生物活性-3
1.4.1抗肿瘤活性-3
1.4.2抗衰老活性-3
1.4.3抗氧化活性-3
1.4.4免疫调节活性-4
1.4.5降血糖、降血脂活性-4
1.5研究的意义及主要内容-4
2材料与方法-5
2.1仪器与设备-5
2.2原料与试剂-5
2.3实验方法-5
2.3.1原材料预处理-5
2.3.2斑褐孔菌多糖的热水浸提工艺-6
2.3.3斑褐孔菌多糖得率测定-6
2.3.4水浴法提取斑褐孔菌多糖的工艺优化-6
2.3.5斑褐孔菌多糖的DEAE-52纤维素柱色谱-7
2.3.6斑褐孔菌多糖的理化性质研究-8
3结果分析-10
3.1葡萄糖质量标准曲线-10
3.2单因素试验-10
3.2.1液料比对斑褐孔菌多糖得率的影响-10
3.2.2热水浸提时间对斑褐孔菌多糖得率的影响-11
3.2.3热水浸提温度对斑褐孔菌多糖得率的影响-11
3.3响应面优化-11
3.3.1 Box-Behnken试验设计及结果分析-11
3.3.2交互效应分析-13
3.3.3最佳工艺优化及验证结果-13
3.4 DEAE-纤维素洗脱曲线-14
3.5标准曲线及理化性质-14
3.5.1蛋白质标准曲线-14
3.5.2糖醛酸标准曲线-15
3.5.3硫酸基标准曲线-15
3.5.4主要理化性质分析-16
3.5.5斑褐孔菌多糖的溶解性检测-16
3.5.6其他理化性质分析-16
结论-16
致谢-18
参考文献-19